常用的緩沖液有很多,如磷酸鹽緩沖液、Tris-HCl緩沖液、HEPES緩沖液、氨基酸緩沖液等。不同的緩沖液差別液很大,今天主要來對比兩種常用的緩沖液:Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液各自的應(yīng)用對比。
1、Tris-HCl緩沖液的應(yīng)用
Tris常用于蛋白或者核酸的緩沖液,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過程中的pH,由于其具有弱堿性,水溶液的pH在10.5左右,可通過添加HCl或者NaOH制備不同pH的緩沖液,根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效范圍通常是pH 7.0-9.2之間。此外,Tris還可以制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物(磷霉素等)的中間物,在化妝品、醫(yī)藥、涂料以及合成中均有應(yīng)用。應(yīng)用于體內(nèi)時,Tris作為一種不含鈉的氨基緩沖堿,在體液中與H2CO3結(jié)合,生成碳酸氫鹽。因此它能緩沖酸,而且能降低CO2張力,有糾正急性呼吸性酸中毒和代謝性酸中毒雙重效果,其作用較碳酸氫鈉快而強(qiáng)。
①Moderna核酸疫苗(mRNA-1273,pH7.0-8.0)
將SM-102、DSPC、膽固醇以及PEG脂質(zhì)與溶于pH 5.0乙酸鹽緩沖液中的mRNA以2.5:1(脂質(zhì):mRNA)的比例混合,再將混合物用Tris-HCl(pH=7.5)中和,加入蔗糖作為冷凍保護(hù)劑,最后將制備得到的溶液進(jìn)行無菌過濾,-70℃下冷凍保存準(zhǔn)備進(jìn)一步使用。
處方:
②恩利(注射用依那西普,Enbrel)
Enbrel是一個全人源的腫瘤壞死因子拮抗劑,是暢銷的藥物之一。
輔料:甘露醇,蔗糖,氨丁三醇(Tris)
2、HEPES緩沖液的應(yīng)用
HEPES緩沖液對細(xì)胞無毒性作用,它是一種氫離子緩沖劑,能較長時間控制恒定的pH范圍。使用時濃度為10-50mmol/L,一般培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/LHEPES即可達(dá)到緩沖能力。在體外診斷、DNA/RNA提取、脂質(zhì)體藥物等方面均有應(yīng)用。
①Onivyde® -伊立替康脂質(zhì)體
是一種拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑,與氟尿嘧啶和甲酰四氫葉酸組合,用于治療基于吉西他濱治療后疾病進(jìn)展的胰腺轉(zhuǎn)移性腺癌患者,為晚期大腸癌的一線用藥,也可用于術(shù)后的輔助化療;對肺癌、乳腺癌、胰腺癌等也有一定療效。
處方:
Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液都是生物制劑中常用的緩沖液,如何選擇需要結(jié)合制劑本身的特性和處方優(yōu)化的需求綜合考量。
1、中文名稱:HEPES(供注射用)
3、英文名稱:(2-hydroxyethyl)piperazine-1-ethanesulfonic acid
4、化學(xué)名稱:N-2-hydroxyethylpiperazine-N'-2-ethanesulfonic acid
5、商品名:HEPES
6、分子式:C8H18N2O4S
7、CAS:7365-45-9
8、級別:化學(xué)試劑級
9、備案登記號:F20220000151
10、DMF備案號:登記中
11、生產(chǎn)商:艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司
12、代理商:艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司
13、 結(jié)構(gòu):
14、性狀:本品為白色或類白色顆?;虬咨Y(jié)晶粉末。
15、純度:>99.5%(各項指標(biāo)詳見COA)。
16、溶解性:Soluble in water (1M )at 20℃
17、分子量:238.3
18、熔點:234-238 °C
19、沸點:210-215℃
20、酸度系數(shù)(PKa):7.5(25℃)
一、 基本信息
1、中文名稱:氨丁三醇
2、英文名稱:Tris Base
3、化學(xué)名稱:三(羥甲基)氨基甲烷
4、商品名:Tris
5、分子式:C4H11NO3
6、CAS: 77-86-1
7、級別:化學(xué)試劑級
8、備案登記號:F20220000153
9、DMF備案號:
10、生產(chǎn)商:艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司
11、代理商:艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司
12、登記號:F20220000153
二、 理化性質(zhì)
1、性狀:本品為白色晶體。
2、純度:>99%(各項指標(biāo)詳見COA)。
3、溶解性:水550 g/L (25℃)
4、分子量:121.14
5、熔點:167-172℃
6、沸點:219-220℃ 10 mm Hg
7、比旋光度:NA
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